Lebensmittelsicherheits-Schnelltest-Kit, entwickelt für gefriergetrocknete Echtzeit-PCR-Reagenzien zur schnellen und empfindlichen Erkennung von Lebensmittelpathogenen

LyoDt^®Gefriergetrocknetes Echtzeit-PCR-Detektionsreagenz fürStaphylococcus  aureus Verwendung

’s Handbuch1. BESCHREIBUNG

Staphylococcus aureus, ein grampositives Kokkenbakterium aus der Gattung Staphylococcus, ist ein weit verbreiteter, durch Lebensmittel übertragener Erreger, der Enterotoxine produzieren kann, die Lebensmittelvergiftungen verursachen.

für den Nachweis vonStaphylococcus aureus .T Gen von Staphylococcus aureus als Nachweisziel. 2. SPEZIFIKATIONEN & ZUSAMMENSETZUNG Kat.-Nr.

Beschreibung

Lagern  bei Raumtemperatur

(5-30°C )4KomponenteT Nach dem Öffnen der Vakuumverpackung lagern Sie die unbenutzten Produkte bitte in dem mitgelieferten wiederverschließbaren Plastikbeutel mit den TrockenmittelnT  im Aluminiumfolienbeutel.VORSICHT:Das Schrumpfen des Reagenzpellets ist ein Hinweis auf das Eindringen von Feuchtigkeit in das Röhrchen und das Anfeuchten des Reagenz. Alle Reagenzien mit einer deutlich kleineren Pelletgröße als üblich sollten verworfen oder vor der Verwendung mit der Positivkontrolle getestet werden 

für die Probenprüfung 

.    4. ZUSÄTZLICHE BENÖTIGTE GERÄTE & REAGENZIEN1) 

Echtzeit-PCR-Gerät

APip

Schritt und Spitzen3) Nuklease

und freies Wasser4) Nukleinsäure-Extraktionskit

5. KOMPATIBLE ECHTZEIT-PCR-SYSTEMEABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600

.

6. AKZEPTABLE PROBENT

7. VORGEHENSWEISE

1) 

Nukleinsäure

Acid nterpretationxtraktionExtrahieren SieDNA

 aus Proben mit einem geeigneten Extraktionskit.Es wird empfohlen, dass dieDNA im letzten Schritt derExtraktionmit etwa 100μl ElutionspuffererforderlichTE odernukleasefreiem H_{15-20 Sekunden lang bei niedriger Geschwindigkeit vortexen und 15-20 Sekunden lang bei niedriger Geschwindigkeit zentrifugieren. Sofort verwenden oder}OKomponente eluiert wird.Die gereinigte Nukleinsäure sollte sofort verwendet oder bei -20°C gelagert werden. sollte vor der Verwendung rehydriert werdenVorbereitung der Positivkontrolle

Schrittbis zu 12 Monate

. Es sollte vor der Verwendung rehydriert werdendurch Zugabe von250 μl TE-Puffer oder nukleasefreiem H2O, _{15-20 Sekunden lang bei niedriger Geschwindigkeit vortexen und 15-20 Sekunden lang bei niedriger Geschwindigkeit zentrifugieren. Sofort verwenden oder} bei -20°C lagern.4T

Schrittix VorbereitungA) Öffnen Sie die Vakuumverpackung und nehmen Sie den 8-Röhrchen-Streifen herauss mit dem Reagenz. Überprüfen Sie, ob sich das Pellet am Boden des Röhrchens befindet

(Schneiden Sie die Anzahl der benötigten Röhrchen abfalls erforderlich) . Wenn die mitgelieferten Röhrchen nicht mit Ihrem Gerät kompatibel sind, übertragen Sie das Reagenzpellet in ein optisches Röhrchen, das mit Ihrem Gerät kompatibel ist.B) Öffnen Sie die Röhrchen und verwerfen Sie die(s) Kappe(n) (nicht für Echtzeit-PCR-Geräte geeignet) und bereiten Sie den Reaktionsmix auf Eis wie unten beschrieben vor.KomponenteVol. /Test

Gefriergetrocknetes Reagenz

(nicht im Lieferumfang enthalten).

D) Vortexen Sie die Röhrchen 10 bis 15 Sekunden lang bei niedriger Geschwindigkeit und zentrifugieren Sie sie 20 Sekunden lang bei 3000 U/min und platzieren Sie sie in einem Echtzeit-PCR-Gerät.2) RT-PCR-Setup

Stellen Sie das Reaktionsvolumen auf 25μl ein und führen Sie das PCR-Amplifikationsverfahren wie unten beschrieben durch. Sammeln Sie die FAM-Fluoreszenz bei 60°C und wählen Sie KEINE als passive Referenz.

SchrittTemp.

Zeit Zyklen

und Interpretation  TemplateCTInterpretation